Bimolecular Fluorescence Complementation (BiFC) מבחן שיטה המשמשת להמחשה ישירות של אינטראקציה בין חלבון לחלבון in vivo באמצעותהדמיה של תאים חיים או תאים קבועים. … BiFC תואר לראשונה על ידי Hu et al.
איך פועל השלמה של פלואורסצנטי דו-מולקולרי?
עקרון העבודה של BiFC מבוסס על פיתוח קומפלקס פלואורסצנטי, כתוצאה מחיבור של שני מקטעים של חלבון פלואורסצנטי כאשר הם נמצאים בסמיכות עקב אינטראקציה חלבון-חלבון במקטעים, כלומר., ב-BiFC, פלואורופור מחולק לקצוות מסוף אמינו וקרבוקסיל.
מהו מבחן BiFC?
ניסוי בימולקולרי פלואורסצנטי (BiFC) מאפשר הדמיה פשוטה וישירה של אינטראקציות חלבון בתאים חיים (45).גישת BiFC מבוססת על היווצרות של קומפלקס ניאון כאשר שני חלבונים שהתמזגו לשברים לא פלואורסצנטיים של חלבון ניאון מקיימים אינטראקציה זה עם זה (איור
למה מתבצעת בדיקת BiFC?
הרעיון של BiFC הוא להביע חצאים של GFP שהתמזגו לחלבונים המעניינים שלכם אם ה-POI פועלים באינטראקציה, תוכלו לחבר את שני החצאים יחד כדי לקבל GFP פונקציונלי. אז אם יש חצי אחד של GFP שמתבטא בתא, אני לא מופתע שנוגדן GFP יכול לזהות אותו.
האם BiFC הפיך?
הבלתי הפיך של מתחמי BiFC תועדה היטב (10), ונראה שרוב, אם לא כולם, מערכות BiFC המבוססות על חלבון פלורסנט הן בלתי הפיכות (8, 33, 43, 48–51).
