היתוך פרוטופלסט מתבצע על ידי הוספת PEG עם ריכוז גבוה של סידן ב-pH של 8-10 ועל ידי electrofusion (Olivares-Fuster et al., 2005). הכלאות סומטיות נוצרות על ידי היתוך של גרעינים וציטופלזמה של שני מינים.
איך ממזגים פרוטופלסטים?
תהליך ההיתוך הסומטי מתרחש בארבעה שלבים:
- הסרת דופן התא של תא אחד מכל סוג צמח באמצעות אנזים צלולאז לייצור תא סומטי הנקרא פרוטופלסט.
- התאים מתמזגים לאחר מכן באמצעות הלם חשמלי (אלקטרופוזיה) או טיפול כימי כדי לחבר את התאים ולהתמזג יחד את הגרעינים.
מהם השלבים בהכלאה סומטית?
השלבים החיוניים בטכניקה של הכלאה סומטית הם: (1) בידוד של פרוטופלסטים, (2) היתוך של פרוטופלסטים, (3) התרבות של פרוטופלסטים לגידול צמחים מלאים, (4) בחירת תאים היברידיים ואימות היברידיות.
איך מזהים פרוטופלסטים היברידיים בהכלאה סומטית?
הכלאה סומטית היא הטכניקה המאפשרת מניפולציה של הגנום הסלולרי על ידי תהליך הנקרא היתוך פרוטופלסט. זהו סוג של שינוי גנטי בצמחים שבאמצעותו שני מינים נפרדים של צמחים מתמזגים יחד כדי ליצור צמח היברידי חדש עם המאפיינים של שניהם.
מה גורם לאיחוי של פרוטופלסט בהכלאה סומטית?
היתוך פרוטופלסט עשוי להיגרם על ידי שדה חשמלי או כימית, על ידי תוספת של 20–40% פוליאתילן גליקול מה שגורם להצטברות פרוטופלסטים ולדילול של פוליאתילן גליקול הגורם לאיחוי פרוטופלסט.יש לבחור את ההיברידית הסומטית לאחר איחוי הפרוטופלסטים.
