איך עושים אימונופלואורסצנטי?

2024 מְחַבֵּר: Fiona Howard | [email protected]. שונה לאחרונה: 2024-01-10 06:37

להלן סקירה כללית של השלבים השונים של פרוטוקול צביעת אימונופלואורסצנטי עקיף

1. תכנון ניסויים והכנת דוגמאות. …
2. קיבוע לדוגמה. …
3. חדירת תאים. …
4. חסימה. …
5. דגירת נוגדנים ראשונית. …
6. דגירת נוגדנים משני. …
7. צביעה נגדית והרכבה.

איך מבצעים אימונופלואורסצנטי?

כל שלבי הדגירה מתרחשים בטמפרטורת החדר

1. שטפו את התאים פעמיים והשתמשו בפינצטה כדי להניח בזהירות את כיסוי הכיסוי עם תאים הפוכים כלפי מעלה לתוך החדר המולח.
2. תקן עם 4% פורמלדהיד למשך 10 דקות ושטוף 3 ×.
3. חלחל עם 0.1% TX-100/PBS למשך 15–20 דקות ושטוף 3 ×.

איך משתמשים באימונופלואורסצנטי בתא?

פרוטוקול חיסון פלואורסצנטי לתאים נצמדים

1. Seed 1–1.5 x10⁴ תאים לכל באר של שקף עם 4 חדרים ב-500 מ"ל של מצע תרבות. דגירה ב-37°C ב-5% CO_2.
2. 32–36 שעות לאחר זריעת התא, הסר את המדיום לתרבית התא ושטוף את התאים 3 פעמים באמצעות 500 µL של 1X PBS.

מהי דוגמה לאימונופלואורסצנטי?

לדוגמה, חוקר עשוי ליצור נוגדנים ראשוניים בעז המזהים מספר אנטיגנים, ולאחר מכן להשתמש בנוגדנים משניים משניים לצביעה המזהים את האזור הקבוע של נוגדן העז (" נוגדני ארנב נגד עז").

מה השימוש בצביעת אימונופלואורסצנטי?

צביעת אימונופלואורסצנטי (IF) היא טכניקה בשימוש נרחב במחקר ביולוגי ובאבחון קליני IF משתמשת בנוגדנים המסומנים בפלורסנט על מנת לזהות אנטיגנים ספציפיים למטרה. ואחריו הדמיה, זוהי טכניקה מאוד ישירה שכן אתה יכול לראות משהו.