כדי להפחית קישור נוגדנים לא ספציפי, וכתוצאה מכך, להפחית את אות הרקע, מומלץ להשתמש בתמיסה חוסמת לפני הדגירה עם נוגדנים פתרון החסימה היעיל ביותר יהיה יהיה זה המכיל סרום מאותו המין שבו הועלה הנוגדן המשני.
איך מונעים כתמי רקע?
הקטנת העובי של חלקי הרקמה יכולה לעזור להפחית את כתמי הרקע. נסה לחתוך חלקים דקים יותר עבור IHC נקי יותר. חשוב גם להקפיד לא לתת לחלקים להתייבש מכיוון שהייבוש עלול לגרום להכתמה לא ספציפית גבוהה.
איך מייעלים את האימונופלואורסצנטי?
מיקרוסקופיה חיסונית פלואורסצנטית: 10 טיפים טכניים להצלחה
- קיבוע תאים והחלמה. …
- ספציפיות של נוגדנים. …
- שימוש בדילול הנוגדנים המתאים. …
- אופטימיזציה של חוצצים וסוכני חסימה. …
- שימוש בצפיפות תאים מתאימה. …
- צביעה מרובה. …
- נוגדנים משניים. …
- Reducing Background.
מה גורם להכתמת רקע?
צביעת רקע יכולה להיגרם עקב קשירת נוגדנים לא הולמת או מטעויות במהלך הכנת שקף הרקמה.
האם נוגדנים משניים מפחיתים אותות רקע?
F(ab) נוגדנים משניים ספציפיים עשויים לסייע בהפחתת אות הרקע על ידי ביטול קישור לא ספציפי של חלבוני IgG שנמצאו ברקמות על ידי הנוגדן המשני.
